紫外可见光谱是利用物质对光的选择性吸收、透射或反射的特性,从而测定、分析、推断物质的组成、含量及结构。
1、定性分析:判断共轭关系及某些官能团。比如在(200~400)nm之间无吸收峰,说明该未知物无共轭关系,且不会是醛、酮,很可能是一个饱和化合物。
2、定量分析:用于测定物质的浓度或含量;
3、异构体的判断。例如:乙酰乙酸乙酯存在酮-烯醇互变异构体。酮式没有共轭双键,在204nm处有弱吸收;烯醇式有共轭双键,在245nm处有强吸收。故可根据它们的紫外吸收光谱可判断其存在与否。
4、纯度检查。例如,如果一化合物在紫外区没有吸收峰,而其中的杂质有较强的吸收,就可方便检出该化全物中的痕量杂质
测试原理
紫外可见近红外光谱是一种用于物质分析和表征的技术,其依赖于物质对不同波长的光的吸收和散射特性。光谱的原理是物质能够对某些波长的光吸收,因为这些波长的光可以提供所需的能量以激发分子的电子轨道。吸收的光的强度作为波长的函数测定,形成一个光谱。
测试步骤
以日本Shimadzu UV-3600i Plus为例,一般测试步骤为:
液体样品:
打开机器预热20min,然后打开软件,设置好【开始波长】、【结束波长】、【数据间隔】、【扫描速度】、以及【光度值类型】、【狭缝宽度】等参数,在样品仓单元的参比侧和样品侧分别放入适量空白溶剂用于扣背景进行基线校正,校正完成后在样品侧放入待测样品,采集样品的谱图。
粉末样品:
打开机器预热20min,然后打开软件,设置好【开始波长】、【结束波长】、【数据间隔】、【扫描速度】、以及【光度值类型】、【狭缝宽度】等参数,利用硫酸钡标准白板进行基线扫描,校正完成后在样品侧放入待测样品,采集样品的谱图。
块体/薄膜样品:
先设置好【开始波长】、【结束波长】、【数据间隔】、【扫描速度】、以及【光度值类型】、【狭缝宽度】等参数,利用硫酸钡标准白板进行基线扫描后,在样品侧用夹具固定住样品,注意将测试面对准积分球样品窗口,采集样品的谱图。